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本試劑盒采用間接競爭ELISA方法，在酶標板微孔上預包被地西泮抗原，樣本中殘留的地西泮和此抗原競爭地西泮的抗體（抗試劑），加入酶標二抗（酶標物）后，經TMB底物顯色，樣本吸光值與其所含地西泮的含量呈負相關，與標準曲線比較再乘以其對應的稀釋倍數，即可得出樣本中地西泮的含量。?

適用范圍

可定性、定量檢測生鮮乳樣本中地西泮的含量。

1、將所需試劑從冷藏環境中取出，置于室溫（20～25°C）平衡30min以上，注意每種液體試劑使用前均須搖勻。?

2、取出需要數量的微孔板，將不用的微孔板放進原錫箔袋中并且與提供的干燥劑一起重新密封，保存于2～8°C。切勿冷凍。?

3、洗滌液在使用前也需回溫。?

4、編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。?

5、加標準品/樣本：加入標準品/樣本50μL，到對應的微孔中，然后加入地西泮抗試劑50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25°C避光環境中反應30min。?

6、洗板：小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用洗滌液250? μL/孔，充分洗滌4～5次，每次間隔10s，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破）。

7、加酶標物：加入地西泮酶標物100μL/孔，輕輕振蕩混勻， ?? 用蓋板膜蓋板后置25°C避光環境中反應15min，取出重復 ?? 步驟6。?

8、顯色：加入底物液A液50μL/孔，再加入底物液B液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置25°C避光環境中反應15min。?

9、測定：加入終止液50μL/孔，輕輕振蕩混勻，設定酶標儀于450nm處（建議用雙波長450/630nm檢測，請在5min內讀完數據），測定每孔OD值(若無酶標儀，則不加終止液用目測法可進行判定)。?

結果判定?

請利用試劑盒專業分析軟件進行計算，更便于大量樣本的準確、快速分析（歡迎來電索取）。